按照高中《生物》教材中“叶绿体中色素的提取和分离”实验的方法和步骤操作，据许多中学老师反映实验效果不很理想。存在的问题有:①采用毛细吸管吸取滤液，画线很难达到“细、齐”的要求;②制备滤纸条时剪去两角，不容易把握;③层析液容易没及滤液细线。④层析后容易出现色素带分离不够充分，或色素带分离过度而造成胡萝卜素在滤纸条上消失的现象。⑤用菠菜作为实验材料，易受季节性限制，此外，色素提取液呈黄绿色，色素带颜色浅，实验效果差。对该实验我们做了一些改进，在此提出。

1装置的改良

针对层析时，滤纸条容易掉到烧杯中，色素带受到阳光的照射易分解情况，我们作法是:

1)取1个大头针，将它的一端折成勾状，另一端插人试管塞，再将1个回形针挂在勾上，用回形针夹住制备好的滤纸条，将试管塞塞住试管口，调节回形针高度可使层析液不没及滤液细线。

2)将不透光的纸用胶水粘成1个比试管略大的圆筒并套在试管外，遮挡阳光，使层析出的色素带不致被光分解;或者将上述装置放在黑暗处，同样可以起到防止色素带在光下分解的作用。

2方法的改进

2.1提取色素

获取高浓度的色素提取液是该实验成功的一个关键环节。一般我们要求色素提取液呈墨绿色。为了得到墨绿色的色素提取液，我们可尝试:

1)称取新鲜绿色叶片2g放人研钵中，将杵和研钵一起放入冰箱－20℃冷冻4～5 h，然后取出进行充分研磨，再加人6 mL色素提取液，用4层纱布过滤，将滤液收集到试管或小烧杯中备用。这样可以增加叶片的软化度，有效破坏组织、细胞结构，降低叶片含水量，从而提高叶绿体中色素的提取效率。

2)称取2g质地柔软、深绿色的草本植物的叶片，除去粗的叶脉和叶柄;分多次加人研钵，当碎叶片被研磨成粘粘的叶泥以后，再继续加人少许碎叶片接着研磨，直到把所有的碎叶片全部研磨好。研磨时可向研钵中加人少量二氧化硅和碳酸钙(也可不加)，待研磨充分后，再加人少量氯化钠(氯化钠是强电解质，能破坏色素中的胶体物质，有利于色素的释放)和6 mL色素提取液，就出现了深绿色的液体，采用4层纱布包着研磨物并挤出滤液，得到墨绿色的色素提取液。

2.2制备滤纸条

一般根据实验所选的试管而定。将干燥处理的滤纸顺纸纹方向剪成长方形纸条，在纸条的一端1.5 cm处折1条细线，并剪去内角(剪角时最好使其与端线成70800的夹角)，另一端可在0.5 cm处穿一小孔，以便将滤纸条挂在大头针上，也可直接用回形针夹住滤纸条。

2.3划滤液细线

课本上采用毛细吸管划线，效果不是很理想。为此，我们尝试以下方法并取得了较好的实验效果:

1)用较薄且干净的盖玻片或塑料胶片，沾取色素提取液印在滤纸条上的方法，色素液晾干后再重复几次，印出的色素液线(最佳宽度为1～2 mm)又细又齐又匀，比用毛细吸管省时省力，层析分离后的效果很好。

2)点样法。用细毛笔、蘸水笔或注射器吸取少量色素提取液点到滤纸条上或圆形滤纸中央，点色素斑比划滤液细线容易得多，且实验效果非常显著。

2.4分离色素

取平面培养皿1只，将一圆形定性滤纸盖在培养皿中，在圆形滤纸中央滴上2-3滴色素提取液，静置约1 min，然后依次滴3～5滴层析液，每滴中间间隔30 s左右，然后盖上培养皿盖，几分钟后，观察结果会得到近似同心圆的4个色素环，由内而外分别是黄绿色、蓝绿色、黄色和橙黄色，实验效果非常明显。此实验方法关键有两点需注意:一是几次滴液体要在同一点上，否则不能形成圆环;二是要掌握好滴层析液的量和时间，否则会影响效果，甚至失败。